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技術文章

Technical articles
小鼠I型膠原蛋白(Col I)ELISA試劑盒
時間│↟:2022-07-29 點選次數│↟:148

【產品名稱】

中文名稱│↟:小鼠I型膠原蛋白(Col I)酶聯免疫試劑盒

 

【包裝規格】

96T/盒

 

【預期用途】

僅供科研使用◕↟☁,本試劑盒用於測定小鼠血清◕↟☁,血漿及相關液體樣本中I型膠原蛋白(Col I)含量↟╃╃╃。

 

【檢測原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠I型膠原蛋白(Col I)水平↟╃╃╃。用純化的小鼠I型膠原蛋白(Col I)抗體包被微孔板◕↟☁,製成固相抗體◕↟☁,往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原蛋白(Col I)◕↟☁,再與HRP標記的I型膠原蛋白(Col I)抗體結合◕↟☁,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物◕↟☁,經過*洗滌後加底物TMB顯色↟╃╃╃。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色◕↟☁,並在酸的作用下轉化成最終的黃色↟╃╃╃。顏色的深淺和樣品中的I型膠原蛋白(Col I)呈正相關↟╃╃╃。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)◕↟☁,透過標準曲線計算樣品中小鼠I型膠原蛋白(Col I)濃度↟╃╃╃。

【產品效能】

1│✘•✘₪、物理效能

試劑盒的各液體組分應澄清透明│✘•✘₪、無沉澱或者絮狀物↟╃╃╃。微孔板鋁箔袋應真空包裝◕↟☁,無破損漏氣(如有漏氣◕↟☁,不影響使用)↟╃╃╃。

2│✘•✘₪、劑量反應曲線線性

標準品劑量反應曲線相關係數r值◕↟☁,大於等於0.9900↟╃╃╃。

3│✘•✘₪、檢測範圍

15 μg/L -450 μg/L ↟╃╃╃。    

4│✘•✘₪、靈敏度

檢出劑量小於3.75 μg/L ↟╃╃╃。

5│✘•✘₪、精密度

精密度用樣品測定值的變異係數CV 表示↟╃╃╃。CV(%) = SD/mean×100

批內差│↟:取同批次試劑盒對低│✘•✘₪、中│✘•✘₪、高值定值樣本進行定量檢測◕↟☁,每份樣本連續測定20 次◕↟☁,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值↟╃╃╃。

批間差│↟:選取3 個不同批次的試劑盒分別對低│✘•✘₪、中│✘•✘₪、高值定值樣本進行定量測定◕↟☁,每個樣本使用同一試劑盒重複測定10 次◕↟☁,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值↟╃╃╃。

批內差│↟: CV<6.2%

批間差│↟: CV<8.6%

6│✘•✘₪、回收率

分別往5個不同樣本中新增已知濃度的目標蛋白◕↟☁,做回收實驗◕↟☁,得出回收率範圍和平均回收率↟╃╃╃。

注意│↟:使用前請檢查試劑盒中試劑的標籤和數量與表格是否一致↟╃╃╃。

需要但未提供的材料及耗材

  1│✘•✘₪、酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)

2│✘•✘₪、精密移液器│✘•✘₪、吸頭│✘•✘₪、加樣槽

3│✘•✘₪、蒸餾水或去離子水

4│✘•✘₪、洗瓶或者自動洗板機

5│✘•✘₪、37℃水浴鍋或恆溫箱

6│✘•✘₪、EP管

7│✘•✘₪、無粉一次性乳膠手套

 

【儲存條件及有效期】

  1│✘•✘₪、2-8儲存◕↟☁,切勿冷凍◕↟☁,有效期6個月↟╃╃╃。

  2│✘•✘₪、開封使用後◕↟☁,包被微孔板放入帶有乾燥劑的自封袋中◕↟☁,密閉自封袋◕↟☁,並將全部試劑放回2-8冰箱↟╃╃╃。

注意│↟:試劑盒內酶標條可拆卸◕↟☁,按實驗需求可分多次使用;使用後的剩餘試劑盒建議在實驗後1 個月內使用完畢↟╃╃╃。產品過期時間以盒子上的標籤為準◕↟☁,保質期內所有組分都確保是穩定的↟╃╃╃。

【結果計算】

  以標準物的濃度為橫座標◕↟☁,OD值為縱座標◕↟☁,在座標紙上繪出標準曲線◕↟☁,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程式◕↟☁,將樣品的OD值代入方程式◕↟☁,計算出樣品濃度◕↟☁,再乘以稀釋倍數◕↟☁,即為樣品的實際濃度↟╃╃╃。 



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