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β2-GP,BIM人β2糖蛋白酶聯免疫試劑盒批發

  • 型   號▩✘:
  • 廠商性質▩✘:生產廠家
  • 所在地▩✘:上海市
  • 價       格▩✘:4800

更新時間▩✘:2022-08-25    服務電話▩✘:13564766906

簡要描述▩✘:β2-GP,BIM人β2糖蛋白酶聯免疫試劑盒批發用於體外定量檢測血清▩▩◕✘↟、血漿▩▩◕✘↟、組織▩▩◕✘↟、細胞上清及相關液體樣本中人β2糖蛋白(β2-GP)的含量·₪╃·↟。

詳細介紹

β2-GP,BIM人β2糖蛋白酶聯免疫試劑盒批發

本試劑盒用於體外定量檢測血清▩▩◕✘↟、血漿▩▩◕✘↟、組織▩▩◕✘↟、細胞上清及相關液體樣本中人β2糖蛋白β2-GP)的含量·₪╃·↟。

有效期▩✘:6個月

儲存條件▩✘:2-8℃

本試劑盒僅供體外研究使用✘•╃↟,不用於臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)·₪╃·↟。往預先包被人β2糖蛋白(β2-GP)捕獲抗體的包被微孔中✘•╃↟,依次加入標本▩▩◕✘↟、標準品▩▩◕✘↟、HRP標記的檢測抗體✘•╃↟,經過溫育並*洗滌·₪╃·↟。用底物TMB顯色✘•╃↟,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色✘•╃↟,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色·₪╃·↟。顏色的深淺和樣品中的人β2糖蛋白(β2-GP)呈正相關·₪╃·↟。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)✘•╃↟,計算樣品濃度·₪╃·↟。

 

β2-GP,BIM人β2糖蛋白酶聯免疫試劑盒批發樣本處理及要求

1.  血清▩✘:全血標本請於室溫放置2小時或4℃過一夜後於1000g離心20分鐘✘•╃↟,取上清即可檢測✘•╃↟,或將標本放於-20℃或-80℃儲存✘•╃↟,但應避免反覆凍融·₪╃·↟。
2.  血漿▩✘:可用EDTA或肝素作為抗凝劑✘•╃↟,標本採集後30分鐘內於2 - 8°C 1000g離心20分鐘✘•╃↟,或將標本放於-20℃或-80℃儲存✘•╃↟,但應避免反覆凍融·₪╃·↟。

3.  組織勻漿▩✘:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織✘•╃↟,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果)✘•╃↟,稱重後將組織剪碎·₪╃·↟。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比✘•╃↟,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS✘•╃↟,具體體積可根據實驗需要適當調整✘•╃↟,並做好記錄·₪╃·↟。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中✘•╃↟,於冰上充分研磨·₪╃·↟。為了進一步裂解組織細胞✘•╃↟,可以對勻漿液進行超聲破碎✘•╃↟,或反覆凍融·₪╃·↟。zui後將勻漿液於5000×g離心5~10分鐘✘•╃↟,取上清檢測·₪╃·↟。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本▩✘:1000g離心20分鐘✘•╃↟,取上清即可檢測✘•╃↟,或將標本放於-20℃或-80℃儲存✘•╃↟,但應避免反覆凍融·₪╃·↟。
注▩✘:標本溶血會影響zui後檢測結果✘•╃↟,因此溶血標本不宜進行此項檢測·₪╃·↟。


標本處理

1.  本公司只對試劑盒本身負責✘•╃↟,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責✘•╃↟,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量✘•╃↟,預留充足的樣本·₪╃·↟。

2.  實驗前應預測標本含量✘•╃↟,如果標本濃度過高✘•╃↟,應對標本進行稀釋✘•╃↟,使稀釋後的標本符合試劑盒的檢測範圍✘•╃↟,計算時再乘以相應的稀釋倍數·₪╃·↟。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)·₪╃·↟。

3.  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中✘•╃↟,建議進行預實驗驗證其有效性✘•╃↟,並注意留存樣本·₪╃·↟。

4.  使用化學裂解液製備的組織勻漿或細胞提取液可能會由於某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差·₪╃·↟。

5.  若樣本為細胞培養上清✘•╃↟,因該類樣本干擾因素較多✘•╃↟,如▩✘:細胞狀態▩▩◕✘↟、細胞數量▩▩◕✘↟、取樣時間等✘•╃↟,所以可能存在檢測不出的情況·₪╃·↟。

6.  某些天然蛋白或重組蛋白✘•╃↟,包括原核及真核重組蛋白✘•╃↟,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配✘•╃↟,而不被檢測出·₪╃·↟。

7.  建議使用新鮮樣本✘•╃↟,儲存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差·₪╃·↟。

 

需要而未提供的試劑和器材

  • 酶標儀(450nm)
  • 高精度加樣器及槍頭▩✘:0.5-10uL▩▩◕✘↟、2-20uL▩▩◕✘↟、20-200uL▩▩◕✘↟、200-1000uL
  • 37℃恆溫箱
  • 蒸餾水或去離子水

 

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備註

微孔酶標板

8孔×12條

8孔×6條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩衝液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

▩✘:

1.  標準品濃度依次為▩✘:8▩▩◕✘↟、4▩▩◕✘↟、2▩▩◕✘↟、1▩▩◕✘↟、0.5▩▩◕✘↟、0 ng/mL

2.  經過大量正常標本檢驗✘•╃↟,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測範圍內✘•╃↟,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可·₪╃·↟。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時✘•╃↟,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋後再進行實驗·₪╃·↟。

 

注意事項

  • 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果·₪╃·↟。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃·₪╃·↟。使用後立即冷藏儲存試劑·₪╃·↟。
  • 洗板不正確可以導致不準確的結果·₪╃·↟。在加入底物前確保儘量吸乾孔內液體·₪╃·↟。溫育過程中不要讓微孔乾燥掉·₪╃·↟。
  • 消除板底殘留的液體和手指印✘•╃↟,否則影響OD值·₪╃·↟。
  • 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色✘•╃↟,已經變藍的底物液不能使用·₪╃·↟。
  • 避免試劑和標本的交叉汙染以免造成錯誤結果·₪╃·↟。
  • 在儲存和溫育時避免強光直接照射·₪╃·↟。
  • 平衡至室溫後再開啟密封袋以防水滴凝聚在冷板條上·₪╃·↟。
  • 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體·₪╃·↟。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性·₪╃·↟。
  • 不能使用過期產品·₪╃·↟。
  • 如果可能傳播疾病✘•╃↟,所有的樣品都應管理好✘•╃↟,按照規定的程式處理樣品和檢測裝置·₪╃·↟。

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡後方可使用·₪╃·↟。

20×洗滌緩衝液的稀釋▩✘:蒸餾水按1▩✘:20稀釋✘•╃↟,即1份20×洗滌緩衝液加19份蒸餾水·₪╃·↟。

 

操作步驟

1.  從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條✘•╃↟,剩餘板條用自封袋密封放回4℃·₪╃·↟。

2.  設定標準品孔和樣本孔✘•╃↟,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加·₪╃·↟。

4.  除空白孔外✘•╃↟,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL✘•╃↟,用封板膜封住反應孔✘•╃↟,37℃水浴鍋或恆溫箱溫育60min·₪╃·↟。

5.  棄去液體✘•╃↟,吸水紙上拍幹✘•╃↟,每孔加滿洗滌液(350μL)✘•╃↟,靜置1min✘•╃↟,甩去洗滌液✘•╃↟,吸水紙上拍幹✘•╃↟,如此重複洗板5次(也可用洗板機洗板)·₪╃·↟。

6.  每孔加入底物A▩▩◕✘↟、B各50μL✘•╃↟,37℃避光孵育15min·₪╃·↟。

7.  每孔加入終止液50μL✘•╃↟,15min內✘•╃↟,在450nm波長處測定各孔的OD值·₪╃·↟。

 

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫座標✘•╃↟,標準品的濃度值為縱座標✘•╃↟,在座標紙上或用相關軟體繪製標準曲線✘•╃↟,並得到直線迴歸方程✘•╃↟,將樣品的OD值代入方程✘•╃↟,計算出樣品的濃度·₪╃·↟。

 

試劑盒效能

1.  檢測範圍▩✘:0.25 ng/mL – 8 ng/mL·₪╃·↟。

2.  靈敏度▩✘:zui低檢測濃度小於0.1 ng/mL·₪╃·↟。

3.  特異性▩✘:不與其它可溶性結構類似物交叉反應·₪╃·↟。

4.  重複性▩✘:板內變異係數小於10% ✘•╃↟,板間變異係數小於15% ·₪╃·↟。

 

說明

1.  由於現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑑定與分析✘•╃↟,本產品可能存在一定的質量技術風險·₪╃·↟。

2.  zui終的實驗結果與試劑的有效性▩▩◕✘↟、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關✘•╃↟,請務必準備充足的標本備份·₪╃·↟。

3.  不同批次的同一產品可能會有少許差別✘•╃↟,如▩✘:檢測限▩▩◕✘↟、靈敏度以及顯色時間等✘•╃↟,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作✘•╃↟,電子版說明書僅作參考·₪╃·↟。

4.  只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果✘•╃↟,不能混用其他製造商的產品·₪╃·↟。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到的檢測結果·₪╃·↟。

 

問題解答

若實驗效果不好✘•╃↟,請及時對顯色結果拍照✘•╃↟,保留所用板條及未使用試劑✘•╃↟,並妥善儲存✘•╃↟,然後我公司為您解決問題·₪╃·↟。同時您也可以參考以下資料▩✘:

問題

可能原因

解決方案

標準曲線差

吸取及洗滌不充分

充分的吸取及洗滌

移液不精確

檢查和校正移液器

精密度低

洗滌不充分

按說明書要求充分洗滌和浸泡

混勻不充分和吸取試劑不足

充分混勻和吸取試劑

重複利用吸頭▩▩◕✘↟、容器和覆膜

使用加樣器要更換新的吸頭▩▩◕✘↟、使用新的容器和覆膜

加樣不精確

檢查和校正移液器

O.D值低

每孔加的試劑量不精確

校正移液器✘•╃↟,精確加入試劑

溫育時間不正確

保證充足的溫育時間

溫育溫度不正確

試劑要平衡至室溫並保證準確的溫育溫度

酶標記物或底物失效

透過混合酶標記物和底物✘•╃↟,顏色應迅速顯現來檢查

沒有加入終止液

按照說明書實驗操作步驟加入終止液

超出讀數時間讀數

在說明書推薦的讀數時間內讀數

樣本值

不正確的樣本儲存方式

正確儲存樣本✘•╃↟,使用新鮮樣本進行實驗

不正確的樣本收集和處理方法

採取正確的樣本收集和處理方法

待測物質在樣本中含量低

使用新鮮樣本✘•╃↟,重複實驗

 


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  • 驗證碼▩✘:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字)✘•╃↟,如▩✘:三加四=7

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